دانشگاه علوم پزشکی جندی شاپور اهواز مجله علمی پزشکی جندی شاپور 2252-052X 17 4 2018 10 23 Study of cytotoxicity of Bacillus anthracis recombinant protective antigen in form of free and encapsulated by double-block PLA-PEG and PCL-PEG copolymers on the Vero cell بررسی سمیت پروتئین نوترکیب آنتی ژن حفاظتی باسیلوس آنتراسیس به شکل آزاد و کپسوله شده توسط کوپلیمرهای دوبلوکه PLA-PEG و PCL-PEG بر روی رده سلولی Vero 377 386 80154 10.22118/jsmj.2018.138145.1409 FA سید مسیح اعتمادایوبی تهرانپارس- انتهای اتوبان شهید بابایی- خیابان شهید چمن آرا- جنب دانشگاه آزاد تهران شمال- خوابگاه دانشجویی حضرت ولیعصر عج حسین هنری تهرانپارس- انتهای اتوبان شهید بابایی- خیابان شهید چمن آرا- جنب دانشگاه آزاد تهران شمال- خوابگاه دانشجویی حضرت ولیعصر عج اشکان حاجی نور محمدی کارشناس ارشد ژنتیک مولکولی مرکز علم و فناوری زیست شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه جامع امام حسین (ع)، تهران، ایران. حامد باقری عضو هیات علمی دانشکده فن آوری های برتر، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران. مجتبی نوفلی موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، بخش واکسن های پزشکی، موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، کرج، ایران Journal Article 2018 06 30 Background & Purpose: Bacillus anthracis is the cause of the fatal anthrax. Using of vaccine is one of the effective ways to combat anthrax. Vaccines should be biocompatible and non-toxic. The purpose of this study was to investigate the effect of Bacillus anthraise recombinant protective, free and encapsulated antigen cytotoxicity by double-block PLA-PEG and PCL-PEG copolymers on the epithelial cell line of the African green monkey (Vero), in order to obtain the amount of the destructive effect of this candidate as the vaccine.<br /> Materials & Methods: In this experimental study, the Bacillus anthraise recombinant protective antigen (PA63) was expressed in E. coli and purified by nickel column affinity chromatography. Subsequently PA63 was encapsulated by PLA-PEG and PCL-PEG double-block copolymers using water-in-oil-in-water solvent evaporation method. Finally, PA63 and nanoparticles cytotoxicity test were performed using the standard MTT test on the Vero cell line.<br /> Results: Results of the MTT test revealed the non-toxicity of the candidate vaccine. Also, the mortality rate of the cells tested against the encapsulated antigen in the nanoparticles was lower than the free antigen. <br /> Conclusion: According to the results, the nano-vaccine formulation can be used to reduce the toxicity of a vaccine produced and eventually acquire an effective and biocompatible recombinant vaccine. سابقه و اهداف: باسیلوس آنتراسیس عامل بیماری مهلک سیاه زخم است. استفاده از واکسن یکی از راه-های موثر مقابله با سیاه زخم می باشد. واکسن‌های ساخته شده مورد پذیرش باید زیست سازگار و بدون سمیت باشند. هدف این پژوهش بررسی اثر سمیت سلولی پروتئین نوترکیب آنتی ژن حفاظتی باسیلوس آنتراسیس به شکل آزاد و کپسوله شده توسط کوپلیمرهای دوبلوکه PLA-PEG و PCL-PEG بر روی رده سلولی اپی‌تلیال کلیه میمون سبز آفریقایی (Vero) به منظور به دست آوردن میزان تاثیر مخرب این کاندید واکسن می باشد.<br /> روش بررسی: در این مطالعه تجربی پروتئین نوترکیب آنتی‌ژن حفاظتی باسیلوس آنتراسیس (PA63) در باکتری اکولای بیان و توسط کروماتوگرافی تمایلی ستون نیکل تخلیص شد. در ادامه PA63 توسط کوپلیمرهای دوبلوکه PLA-PEG و PCL-PEG با استفاده از روش تبخیر حلال کپسوله شد. در نهایت آزمون سمیت سلولی PA63 و نانوذرات به دست آمده با استفاده از آزمون استاندارد MTT بر روی رده سلولی Vero انجام گردید.<br /> یافته‌ها: نتایج حاصل از آزمون MTT عدم سمیت کاندید واکسن مورد نظر را نشان داد. همچنین میزان مرگ و میر سلول‌های مورد آزمون در مقابل آنتی ژن کپسوله شده در نانوذرات کمتر از آنتی ژن آزاد بوده است. <br /> نتیجه: با توجه به نتایج به دست آمده می‌توان از فرمولاسیون نانو واکسن تهیه شده برای کاهش اثر سمیت سلولی آنتی ژن تهیه شده در محیط زنده استفاده کرد و در نهایت به واکسن اثرگذار و زیست سازگار مهندسی شده نوترکیب دست یافت. https://jsmj.ajums.ac.ir/article_80154_b2d07452cf118e98723c0dae380ea76b.pdf