بررسی ژن‌های بتالاکتامازی bla-CTX-M-15 و bla-AmpC (FOX) در ایزوله های کلبسیلا پنومونیه جدا شده از بیماران بستری در بیمارستان‌های شهر اصفهان

نوع مقاله: مقاله پژوهشی

نویسندگان

1 گروه زیست شناسی، دانشکده علوم، دانشگاه ایلام، ایلام، ایران.

2 دانشجوی کارشناسی ارشد گروه زیست شناس، گروه زیست شناسی، دانشکده علوم، دانشگاه ایلام، ایلام، ایران

چکیده

زمینه و هدف: مقاومت به ‌آنتی ‌بیوتیک‌های بتالاکتام در میان ایزوله‌های بالینی، در بیشتر موارد ناشی از آنزیم‌های بتالاکتامازی است. هدف این مطالعه بررسی الگوی مقاومت آنتی‌بیوتیکی وبررسی میزان ژن‌های بتالاکتامازی blaCTX-M-15 و blaFOXM در نمونه‌های بالینی کلبسیلا پنومونیه جدا شده از بیمارستان‌های شهر اصفهان بود.
روش بررسی: در این مطالعه توصیفی، در طی یک دوره یک ساله از شهریور 1393 تا 1394 تعداد 80 نمونه کلبسیلا پنومونیه جدا شده از بیماران بسری در بیمارستان های الزهرا و غرضی تهران جدا شد. این سویه ها بوسیله تست‌های بیوشیمیایی و میکروبیولوژیکی تشخیص داده شدند و الگوی مقاومت آنها نسبت به 10 آنتی‌بیوتیک مختلف با روش آگار دیسک دیفیوژن مشخص گردید ,و سویه‌های تولید کننده آنزیم‌های بتالاکتامازی، با روش های فنوتیپی و دیسک ترکیبی شناسایی گردیدند. و میزان ژن‌های بتالاکتامازی blaCTX-M-15 و blaFOXM در آنها به روش PCR تعیین گردید.
یافته‌ها: نتیجه آنتی بیوگرام نشان داد که بیشترین  میزان مقاومت مربوط به آنتی‌بیوتیک کوتریموکسازول به میزان 55 درصد و کمترین میزان مقاومت نسبت به ایمی پنم به میزان 5/7 درصد بود. از تعداد 80 نمونه مورد بررسی، 31 ایزوله (75/38%)  از طریق تست‌ تایید فنوتیپی و دیسک ترکیبی بعنوان مولد بتالاکتامازهای وسیع الطیف شناخته شدند. نتایج حاصل از PCR نشان داد که تعداد 17 ایزوله (7/32%) دارای ژن blaCTX-M-15 و 9 ایزوله (3/17%) دارای ژن blaFOX بودند.
نتیجه‌گیری: نتایج این پژوهش میزان بالای آنزیم های ESBL را در میان جدایه های کلبسیلا نشان داد، از این رو برای کنترل عفونت و جلوگیری از گسترش مقاومت در میان نمونه های کلینیکی، مدیریت صحیح درمان ضروری می‌باشد.

کلیدواژه‌ها


1-Mulvey RM, and Simor EA. Antimicrobial resistance in hospitals: How concerned should we be? Canadian Medical Association Journal 2009; 180(4): 408-415.

2-Mendonc N, Manageiro V, Robin F. The Lys234Arg substitution in the enzyme SHV-72 is a determinant for resistance to clavulanic acid inhibition.  Antimicrobial Agents and Chemotherapy 2008; 52(1): 1806-1811.

3-Garner J S.The Hospital Infection Control Practices Advisory Committee. Infection Control and Hospital Epidemiology 1996; 17(1): 53-80.

4-Muto CA, Jernigan J A, Ostrowsky BE, Richet HM, Jarvis WR, Boyce J M. SHEA guideline for preventing nosocomial transmission of multi-drug resistant strains of Staphylococcus aureus and Enterococcus.Infection Control and Hospital Epidemiology 2003;24(5): 362-86.

5-Silva J, Agullar C, Ayala G. TLA-1: a new plasmid-mediated extended-spectrum β-lactamase from Escherichia coli. Antimicrobial Agents and Chemotherapy 2000; 44(1): 997-1003.

6-Bradford A P. Extended-spectrum β-lactamases in the 21st century: characterization, epidemiology and detection of this important resistance threat. Clinical Microbiology Reviews 2001; 14(4): 933-51.

7-Jacoby A G, and Medeiros A A. More extended spectrum β-lactamases. Antimicrobial Agents and Chemotherapy 1991; 35(9): 1697-1704.

8-Lin C F, Hsu S K, Chen C H, Huang J R, Lo H H .Genotypic detection and molecular epidemiology of extended-spectrum b-lactamase producing Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae in a regional hospital in central Taiwan. Journal of Medical Microbiology, 2010; 59(6): 665-71.

9-Singhal S, Mathur T, Khan S. Evaluation of methods for AmpC β-lactamases in gram negative clinical isolates from tertiary care hospital. Indian Journal of Medical Microbiology.2005; 23(2): 120-124.

 

10-Hanson N D, and Sanders C C. Regulation of inducible AmpC β–lactamases expression among Entrobacteriaceae. Current Pharmaceutical Design, 2005; 5(1): 881-884.

11-Philippon A, Arlet G, Jacoby G A. Plasmid determined AmpC-type beta-lactamases.  Antimicrobial Agents Chemotherapy. 2002; 46(1): 1-11.

12-CLSI. Performance standards for Antimicrobial Susceptibility Testing: Twentieth in formaonal supplemented CLSI document M100-S20. Wayne PA: Clinical and Laboratory Standards Institute 2013.

13-Jafari M,  Fallah F, Borhan R S, Navidinia M, Karimi A, Hashemi A. The First Report of CMY, aac (6′)-Ib and 16S rRNA Methylase Genes Among Pseudomonas aeruginosa Isolates From Iran. Archives of Pediatric Infectious Diseases 2013; 1(3): 109-112.

14-Coudron P E, Moland E S, Thomson K S. Occurrence and detection of AmpC betalactamases among Escherichia coli, Klebsiella pneumonia and Proteus mirabilis isolates at a veterans medical center. Journal of Clinical Microbiology 2000; 38(5): 1791-6.

15-Soha A.H and Lamiaa A A. Occurrence and detection of AmpC b-lactamases among Enterobacteriaceae isolates from patients at Ain Shams University Hospital. The Egyptian Journal of Medical Human Genetics 2015; 16(1): 239–244.

16-Perez-Perez FJ, Hanson ND.  Detection  of plasmid-mediated  AmpC  beta-lactamase  genes in  clinical  isolates  by  using  multiplex  PCR.  Journal of  Clinical Microbiology 2002; 40(6): 2153-62.

17-Li Q, Lee J Y, Castillo R,  Hixon M S,  Pujol C, Doppalapudi V R, Shepard H M, Wahl G M, Lobl T J, Chan M F. A novel antibacterial agent with broad-spectrum activity and enhanced potency against beta-lactamase producing strains. Journal of Antimicrobial Chemotherapy 2002; 46(1): 1262-8.

18-Mirsalehian A, Akbari-nakhjavani F, Peymani A, Kazemi B, Jebal-Ameli F, Mirafshar S M. Prevalence of extended spectrum b-lactamase producing Entrobacteriaceae by phenotypic and genotypic methods in intensive care units in Tehran. Iran Daru 2008; 16(1):169-73.

19-Behroozi A, Rahbar M, Vand Yousefi J. Frequency of extended spectrum beta-lactamase (ESBLs) producing Escherichia coli and Klebsiella Pneumoniae isolated from urine in an Iranian 1000-bed tertiary care hospital. African Journal of Microbiology Research 2010; 4(9): 881-884.

20-Ghafourian S, Bin S Z, Sadeghifard N. The prevalence of ESBLs producing Klebsiella pneumoniae isolates in some major hospitals, Iran. The Open Microbiology Journal 2011; 5(2): 91-5.

21-Alizadeh H, Moemeni R, Doulatshah L. Frequency of Klebsiella Pneumoniae isolates producing ESBL enzymes from clinical specimens. Journal of laboratory Science 2014; 1(1):64-71.

22-Udomsantisuk N, Nunthapisud P. Molecular characterization of extended spectrum beta-lactamase among clinical isolates E.coli and Klebsiella Pneumoniae. Journal of the Medical Association of Thailand 2011;94(12): 1504-12.

23-Shibl A, Al-Agamy M, Memish Z, Senok A, Khader S A, Assiri A. The emergence of OXA-48- and NDM-1 positive Klebsiella Pneumoniae in Riyadh, Saudi Arabia. International Journal of Infectious Diseases 2013; 17(12): 1130-3.

24-Lal P, Kapi A, Das B K, Sood S. Occurrence of TEM and SHV gene in extended-spectrum beta lactamases (ESBLS), producing Klebsiella Sp. Isolated from a tertiary care hospital. Indian Journal of Medical Research 2007; 125(2): 173-8.

25-Amraei Sh, Eslami G, Taherpour A, Godarzi H, Hashemi A. Molecular diagnosis of FOX, MOX and ACT genes in beta lactamase producing Klebsiella pneumoniae species. Mazandaran medical science Journal 2014; 11(8): 11-20.

26-Japoni Negad A, Mousavifard N, Safari M, Kazemeian H, Tabibneghad M, Amoozandeh N A, Abtahi H, Ghaznavirad A. Frequency of betalactamases enzymes genes encoding mediated by plasmid in clinical isolates in Klebsiella pneumoniae. Journal of Medical Science in Isfahan. 2013; 249:1285-1295.  

27-Rastegar L A, Azimi L, Rahbar M, Fallah F, Alaghehbandan R. Phenotypic detection of Klebsiella pneumoniae carbapenemase among burns patients: first report from Iran. Burns 2013; 39(1): 174-6.

28-Darakhshan S. Genotyping of PRGE, MLVA and evaluation of genetical diversity in bla CTM-M1 in Klebsiella pneumoniae. 179-183 (Persian).